بهینه سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم در بادام

از آنجاکه انتقال دایم ژن و تولید گیاه تراریخته به ویژه در گیاهان چند­ساله مانند بادام لازمه ی صرف وقت و هزینه است، بهینه سازی عوامل مختلف اثر گذار در تراریزش گیاهان، مورد توجه قرار می­گیرد. بیان موقت ژن با استفاده از اگروباکتریوم (اگرواینفیلتریشن) یک راهکار مفید برای بررسی عملکرد ژن در سیستم های بیانی متفاوت است. از آنجاکه بهینه­ کردن فاکتورهای مؤثر در روش های تراریزش لازمه برنامه های انتقال ژن است، این پژوهش با هدف توسعه یک سیستم کارآمد برای بیان موقت به واسطه اگروباکتریوم در برگ های بادام، جهت پیش بینی سریع عملکرد سیستم های تظاهر و پروتئین نوترکیب در بادام انجام شد. ژن گزارشگر لیکیناز برای ارزیابی عواملی که سطح بیان موقت را تحت تأثیر قرار می­دهند، به کار­برده­ شد. مزیت اصلی استفاده از این ژن، سادگی کار، حساسیت بالا و ایمنی زیستی آن است. سه سیستم تظاهر مختلف حامل ژن لیکیناز، که تحت تأثیر عناصر تنظیمی متفاوت قرار داشتند به واسطه دو سویه اگروباکتریوم lba4404 و gv3501 با استفاده از سرنگ بدون سوزن به برگ های رقم های مامایی و شاهرود 12 بادام انتقال داده­شد. بعد از سه روز میزان پروتئین فعال اندازه گیری شد. آزمون های آماری نشان داد که بیشترین میزان تولید پروتئین در برگ های رقم مامایی با استفاده از سیستم تظاهری که موجب تجمع پروتئین در شبکه آندوپلاسمی می شود، با کاربرد سویه lba4404 به دست می­آید. از این رو سیستم تظاهر مربوطه و سویه باکتری lba4404 و رقم مامایی بادام جهت دستیابی به بادام تراریخته پیشنهاد می شود.